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血液RNA常温保存/运输/提取试剂盒产品选择指南

发布时间:2022-10-23 12:52:17人气:

血液RNA常温保存/运输/提取试剂盒产品选择知识大全

1.客户需要收集保存零散送来的新鲜抗凝血样,将来统一提取,并不打算4度或者常温的较长时间运输。
 首选R213-50超速全血(液体样本)总RNA提取试剂盒,在临床上采血时,可以先把试剂盒中的裂解液RLS( 也就是液体样品RNA提取试剂货号:R012-100 RNAzol LS Reagent)分装750 μl到1.5ml的离心管中。血液样本可以先抗凝处理(EDTA抗凝或者其他抗凝方式都可),然后取250 μl全血样品加入到750μl的RNAzol LS Reagent中,用移液枪反复抽打并振荡混匀,在室温裂解5min-10min,直至血细胞充分发生裂解。然后可把此裂解液直接保存在-20℃下可达1-2个月,-80℃可达半年(推荐温度越低越好)。后续可以按照R213-50试剂盒后续操作步骤直接提取RNA。运输过程可以冰袋运输4℃ 1天,干冰运输-20℃ 一周。
注意:如果客户需要保存处理提取RNA的血液体积超过0.25ml,可以单独购买更多的裂解液RLS( 也就是液体样品RNA提取试剂货号: R012-100 RNAzol LS Reagent),并按照R012-100 RNAzol LS Reagent的说明书提取,

 

2.  客户需要收集保存新鲜抗凝血样,并且需要常温或者4度的不超过3-5天的运输(当然如果运输能用干冰运输肯定效果更好)。运输到目地地后负80度冰箱至少可以保存半年。
   这种情况有两种解决方案,一种是R115-100无液氮RNA样品储存液(RNAlater)保存和配套提取试剂盒的方案,一种是PAXgene采血管和配套提取试剂盒的方案。
    而有明确文献证据证明
R115-100无液氮RNA样品储存液(RNAlater)方案RNA产量至少是PAXgene方案的一倍,RNA完整性也要更好!所以,首先推荐R115-100无液氮RNA样品储存液(RNAlater)方案。

A: R115-100无液氮RNA样品储存液(RNAlater(对应的进口qiagen或者life的产品名RNAlater)方案:
运输保存:首先按照正常的采血流程获得抗凝新鲜血,充分颠倒混匀后,吸取300-500 μl抗凝全血加入到1.3 ml RNAfixer(RNAlater)中颠倒充分混匀,就可以开始运输了。一般建议常温或者4度运输不超过3天,更长时间运输会有RNA产量逐渐降低,如果时间更长,建议使用干冰运输。到达目的地后,放负80度,至少保存半年。
提取RNA保存在R115-100无液氮RNA样品储存液(RNAlater中的血样因为样品中含有大量的硫酸铵(RNAlater的主要成分),所以普通试剂盒无法提取,或者提取的产量很低,纯度也差,必须用特制的试剂盒提取,需选择本公司R510-50-RNAstore Blood RNA Kit提取(该试剂盒为本公司国内首家和独家产品),按照R510-50试剂盒的说明书进行提取。也可以用对应的国外试剂盒Ambion/life的RiboPur-Blood Kit(Cat: AM1928)提取,但是国外的有3个显著缺点1. 太昂贵。2. 国内经常没现货,供货无保障,基本这个产品国外公司在国内无资深懂行的技术人员进行指点和技术支持。 3. 没有配套的DNA酶柱上消化,洗脱下来的RNA会残留DNA还需要进一步繁琐的步骤去除DNA。
B: PAXgene采血管(BD 762165 PAXgene Blood RNA Tube)方案:
运输保存:按照PAXgene Blood RNA tube 静脉真空采血管(全血RNA管)说明书采集血液。该系统可以收集全血、稳定核酸、纯化RNA。该采血管中添加了特殊的试剂,可以快速地保护细胞内的RNA被降解,在18~25℃可以保存3天,2~8℃可以保存5天。到达目的地后,放负80度,至少保存4年。
提取RNA保存在PAXgene采血管的中血样提取,必须用特制的试剂盒提取,需选择本公司R419-50-PAX blood RNA kit(For PAXgene blood tube),该试剂盒为本公司国内首家和独家产品,按照R419-50试剂盒的说明书进行提取。也可以用对应的国外试剂盒Qiagen的PAXgene Blood RNA Kit (Cat: 762174)提取,但是国外的有2个显著缺点1. 太昂贵。2. 国内经常没现货,供货无保障,基本这个产品国外公司在国内无资深懂行的技术人员进行指点和技术支持。

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